第一節(jié) PCR擴(kuò)增儀項目產(chǎn)業(yè)投資機(jī)會 分析

目前人類常見傳染病約200余種，其中有90余種屬人獸共患玻近30年來，新出現(xiàn)的人獸共患病就有30多種。如西尼羅河（WestNile）熱病毒并享德拉（Hendra）病毒并尼帕（Nipah）病毒并禽流感等都是人獸共患玻瘋牛病因子可以使牛致死，也可以使人患上新型克雅氏癥；迄今，高致病性禽流感（H5N1）病毒已在亞洲奪去了數(shù)十人的生命，數(shù)以千萬計的家禽被撲殺，除了人和禽類，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)貓和豹等貓科動物也會感染H5N1型禽流感病毒。一些新的傳染病不斷出現(xiàn)，檢測的需求增加，是未來PCR擴(kuò)增儀的良好投資機(jī)會。

第二節(jié) PCR擴(kuò)增儀項目產(chǎn)業(yè)投資前景 分析

一、PCR擴(kuò)增儀項目產(chǎn)業(yè)投資發(fā)展前景

我國人口眾多，醫(yī)療設(shè)備市場空間極大。PCR擴(kuò)增儀已經(jīng)成為醫(yī)院臨床分子監(jiān)測的必然選擇。目前，不僅省市三甲醫(yī)院開始采購，地縣醫(yī)院也有購置這類設(shè)備的需求。PCR擴(kuò)增儀市場推廣前景很大。

二、中國PCR擴(kuò)增儀項目市場蘊(yùn)藏的商機(jī)

1、基因工程 研究 領(lǐng)域

1）基因表達(dá) 研究

RQ-PCR方法能檢測各種組織細(xì)胞中基因的表達(dá)豐度，從而 分析 基因的表達(dá)調(diào)控，監(jiān)控mRNA表達(dá)模式，檢測組織中少量存在的基因，跟蹤群體細(xì)胞中克隆型，定量 分析 基因在不同組織中的轉(zhuǎn)錄水平等。此外，RQ-PCR也用來 研究 各種處理如受病毒感染對細(xì)胞mRNA含量變化的影響，鍛煉等對mRNA表達(dá)的影響，以及比較感染組織與正常組織中各mRNA含量，不同組織中基因表達(dá)情況等。

2）轉(zhuǎn)基因安全檢測

現(xiàn)在轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品很流行，但是，在轉(zhuǎn)基因食品，疫苗和治療中介如外源物質(zhì)可能引起危險。因此在安全檢測中，利用高敏感的PCR來檢測這些物質(zhì)是很關(guān)鍵的。RQ-PCR可用于對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測和定量。根據(jù)目前轉(zhuǎn)基因技術(shù)中使用的基因構(gòu)件主要來源于花椰菜花葉病毒（CaMV）的35S啟動子和農(nóng)桿菌的NOS終止子，絕大部分轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中含有這兩個基因片段，用RQ-PCR檢測定量35S啟動子和NOS終止子就可達(dá)到簡便，快速，準(zhǔn)確的檢測轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的目的。

此外，RQ-PCR在動物中基因治療載體的生物分布的確定，生物療法中殘留DNA的含量，污染細(xì)胞庫和終產(chǎn)物中病毒和細(xì)菌核酸檢測等生物安全檢測中都有廣泛應(yīng)用。

3）單核苷酸多態(tài)性(SNP)及突變 分析

實時定量PCR的一個誘人的應(yīng)用前景是用于檢測基因突變和基因組的不穩(wěn)定性?；蛲蛔兊臋z測基于兩條探針，一條探針橫跨突變位點，另一條為錨定探針，與無突變位點的靶序列雜交。兩條探針用兩種不同的發(fā)光基團(tuán)標(biāo)記。如靶序列中無突變，探針雜交則完全配對，如有突變，則探針與靶序列不完全配對，會降低雜交體的穩(wěn)定性，從而降低其溶解溫度（Tm）。這樣便可對突變和多態(tài)性進(jìn)行 分析 。

2、醫(yī)學(xué) 研究 領(lǐng)域

1）病原體檢測

RQ-PCR技術(shù)可以快速，準(zhǔn)確定量的測出高至1010，低至100個拷貝數(shù)的病原體，定量范圍極寬。過去人們對乙肝病毒(HBV)的檢測主要依靠間接指標(biāo)----乙肝表面標(biāo)志物。但是僅僅根據(jù)HbsAg陽性或陰性，在臨床醫(yī)學(xué)中很難判斷患者體內(nèi)病毒是否處于復(fù)制期，病毒復(fù)制的量又如何，以及患者是否具有傳染性等。常規(guī)PCR方法也能定性檢測HBV,但是RQ-PCR能快速和精確定量，更好解決這一難題，如RQ-PCR檢測HBV-DNA的結(jié)果為101~105拷貝/ml時，表明病毒復(fù)制水平低，傳染性較弱；而當(dāng)HBV-DNA大于105拷貝/ml時，表明病毒復(fù)制水平高，傳染性較強(qiáng)。另外，HBV-DNA的定量檢測可及時靈敏地監(jiān)測患者藥物治療的效果。

目前，用此方法還進(jìn)行了對人類免疫缺陷病毒，結(jié)核病毒，巨細(xì)胞病毒，EB病毒，流感病毒A,流感病毒B等病原體的檢測。熒光定量PCR問世后的幾年中，積累了大量有關(guān)病原體核酸量與感染性疾病發(fā)生，發(fā)展和預(yù)后之間關(guān)系的資料，這些 研究 資料不斷豐富，將形成感染性疾病的臨床分子診斷標(biāo)準(zhǔn)。

2）腫瘤 研究

腫瘤的本質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)基因發(fā)生了變化，是一種多基因異常的疾病。癌基因的表達(dá)增加和突變在許多腫瘤早期和良性階段就可出現(xiàn)。RQ-PCR不但能有效地檢測基因的突變，而且能準(zhǔn)確測定表達(dá)量，可進(jìn)行腫瘤的早期診斷和治療效果及預(yù)后的判斷

目前應(yīng)用實時定量PCR技術(shù)檢測基因異常變化的方法已進(jìn)行過端粒酶hTERT基因，慢性粒細(xì)胞性白血病bcr/abl融合基因，腫瘤ER基因，前列腺癌PSM基因，腫瘤相關(guān)的病毒基因的表達(dá)檢測。

3、展望

RQ-PCR技術(shù)的準(zhǔn)確，靈敏，快速和經(jīng)濟(jì)給人們帶來了極大的方便和利益，大大降低了假陽性率，工作效率高，結(jié)果重現(xiàn)性好，而且不必使用對人體有害的染色劑?，F(xiàn)在RQ-PCR技術(shù)廣泛的應(yīng)用于醫(yī)學(xué)方面，主要是在病原體檢測方面。在植物學(xué)，動物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用的不多。但是隨著RQ-PCR技術(shù)與生物芯片技術(shù)，肽核酸技術(shù)，微解剖技術(shù)等先進(jìn)技術(shù)的整合，相信RQ-PCR技術(shù)的應(yīng)用前景將越來越廣闊。

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